预染蛋白maker和未染色蛋白maker |
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进行western blot时,使用预染的蛋白maker有助于: - 在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中监测蛋白分离 - 验证凝胶和膜(PVDF、尼龙或硝酸纤维素)之间的转移效率 - 用抗体染色生成的图像覆盖含蛋白maker的膜的图像,从而计算蛋白质的近似大小。 使用未染色的蛋白maker(例如未染色的蛋白maker ab234618)有助于准确计算蛋白质大小。但是,未染色的蛋白maker需经考马斯亮蓝染色或类似的非特异性蛋白染色才能看到。由于预染色maker使用的染料会轻微歪曲凝胶上蛋白片段蛋白的表观大小,所以未染色的蛋白片段对蛋白质大小的测定更准确。 即用型蛋白maker使用起来最方便,上样至凝胶前无需加热、稀释或添加还原剂。预染色maker还可以使用不同颜色的高亮条带,确保能够识别不同大小的条带。 选择合适的预染色蛋白maker时,需参考目标蛋白的大小。对于大多数研究者,我们通常推荐: a)ab116027,用于10和180 kDa之间的蛋白 b)ab116028,用于最大为245 kDa的较大蛋白 c)ab116029,用于最小为3.5 kDa的较小蛋白 d)ab116029 或 ab234592,用于同时研究较小和较大的蛋白。 预染色蛋白maker表 大小范围耐剥离和耐洗涤性高颜色条带数量ab116027中等范围: 10 - 180 kDa蓝色夹带红色及绿色高亮条带10ab115832中等范围: 10-175 kDa粉色夹带蓝色高亮条带11ab234617中等范围: 10 – 180 kDa是蓝11ab116028宽范围: 10-245 kDa蓝色夹带红色及绿色高亮条带12ab116029超宽范围: 5 - 245 kDa蓝色夹带红色及绿色高亮条带13ab234592超宽范围: 6.5 – 270 kDa是蓝色夹带红色及绿色高亮条带10图表显示了各预染色maker中的每一条蛋白标志物大小 |
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